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dianas 9 (1) Escobar etal 2020 Indoxil sulfato induce senescencia y liberación de microvesículas en células endoteliales que promueven la calcificación vascular.

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dianas | Vol 9 Num 1 | marzo 2020 | e202003fa05

Indoxil sulfato induce senescencia y liberación de microvesículas en células endoteliales que promueven la calcificación vascular.

1. Departamento de Biología de Sistemas, Facultad de Medicina y Ciencias de la Salud, Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid, Spain.  2. Departamento de Biomedicina y Biotecnología, Facultad de Ciencias, Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid, Spain.  3. Departamento de Fisiología Animal (II), Facultad de Biología, Universidad Complutense de Madrid, Madrid, Spain.  4. Institute of Investigation, Hospital 12 de Octubre, Madrid, Spain.

abeatriz.ed98@gmail.com

V Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2020.
16-18 de marzo, 2020. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.

Resumen

Antecedentes: Tanto los ancianos como los pacientes con enfermedad renal crónica (ERC) tienen una mayor probabilidad de sufrir enfermedades inflamatorias cardiovasculares (EICVs), las cuales pueden asociarse a la calcificación vascular como inicio de las mismas. Las células endoteliales tienen una senescencia prematura como mecanismo fisiopatológico en la ECV asociada a ERC. Hemos demostrado que las microvesículas (MVs) producidas por estas células senescentes, debido a su capacidad de comunicación intercelular, pueden iniciar dicha calcificación. Además, las toxinas urémicas, como el indoxil sulfato (IS), que se relacionan con la ERC, también pueden generar una senescencia endotelial precoz, lo que puede secretar MVs que inicien la calcificación vascular. Todo esto permite que las MVs puedan ser útiles para su caracterización como biomarcadores tempranos y/o diana terapéutica en estas patologías.

Materiales y métodos: Se trataron células endoteliales (HUVEC) con IS. La senescencia se cuantificó por el método de β-galactosidasa. Por citometría de flujo se aislaron y se caracterizaron las MVs producidas por las HUVEC senescentes, y se utilizaron para el tratamiento de células musculares lisas (HASMC) durante 9, 20 y 30 días. En HASMC se valoraron los depósitos de calcio por el colorante rojo alizarina. A los 30 días, mediante el kit de fenolsufoneftaleina, se cuantificó el contenido de calcio. Mediante PCR cuantitativa se determinó en HASMC la expresión de genes pro-calcificantes y por western blot la expresión de un marcador específico de HASMC (SM22α).

Resultados: El tratamiento con IS indujo senescencia precoz en HUVEC (control: 7,07±2,87% vs. IS: 72,90±13,09%, p<0.0001) y se observó un incremento en la producción de MVs (control: 1,68±1.00 vs. IS: 9.92±4,29 MVs/célula, p<0.005). Las MVs procedentes de células con senescencia precoz por el efecto del IS indujeron calcificación en HASMC, en un proceso asociado a desregulación en la expresión de genes procalcificantes (Runx2, BMP2). Además, las MVs generadas en HUVEC tratadas con IS producen un proceso de desdiferenciación de las HASMC (expresión de SM22α).

Conclusión: Las células endoteliales que tienen una senescencia precoz como consecuencia del estrés oxidativo generado por las toxinas urémicas son capaces de producir MVs que promuevan la calcificación vascular. Su cuantificación en plasma permite que se pueda utilizar como biomarcador para valorar la progresión de la enfermedad en sujetos susceptibles y para diseñar dianas terapéuticas que eviten la generación o la presencia en el espacio extracelular de MVs procalcificantes.

Cita: Escobar, Beatriz; Bodega, Guillermo; Carracedo, Julia; Ramírez, Rafael; Alique, Matilde (2020) Indoxil sulfato induce senescencia y liberación de microvesículas en células endoteliales que promueven la calcificación vascular. Actas del V Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2020. 16-18 de marzo, 2020. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España. dianas 9 (1): e202003fa05. ISSN 1886-8746 (electronic) journal.dianas.e202003fa05 http://www3.uah.es/dianas?e202003fa05. URI http://hdl.handle.net/10017/15181. DOI https://doi.org/10.37536/DIANAS.2020.9.1.57

Copyright: © Escobar B, Bodega G, Carracedo J, Ramírez R, Alique M. Algunos derechos reservados. Este es un artículo open-access distribuido bajo los términos de una licencia de Creative Commons Reconocimiento-NoComercial-SinObraDerivada 4.0 Internacional. http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/

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dianas 9 (1) Alcón-Calderón etal 2020 Terapia génica contra la insensibilidad congénita al dolor con anhidrosis.

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dianas | Vol 9 Num 1 | marzo 2020 | e202003fa04

Terapia génica contra la insensibilidad congénita al dolor con anhidrosis.

Departamento de Biología de Sistemas, Facultad de Medicina, Universidad de Alcalá (UAH). Alcalá de Henares (Madrid).

aandrecris19971997@gmail.com

V Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2020.
16-18 de marzo, 2020. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España.

Resumen

La insensibilidad congénita al dolor es una condición congénita rara, siendo el tipo IV de la enfermedad, que además presenta anhidrosis, el más frecuente entre la población y para el cual actualmente no existe tratamiento y los estudios al respecto son puramente teóricos. En este trabajo teórico proponemos el estudio molecular de la enfermedad para permitir el desarrollo de terapias encaminadas a solventar el problema. Para ello, estudiamos el gen NTRK1, gen codificante del receptor tirosina quinasa TrkA, que actúa como regulador de la diferenciación de neuronas sensoriales y que en este caso, se encuentra mutado. El estudio de esta mutación y sus consecuencias se realizó mediante ensayos de secuenciación y genotipado de individuos, así como también se propuso una terapia génica con CRISPR/Cas9 en modelos in vivo y diversos ensayos in vitro mediante western-blot y citometría de flujo. Nuestros resultados muestran la posibilidad de diseñar un diagnóstico de portadores y de aplicar la terapia génica con el fin de revertir la mutación del gen y conseguir el correcto funcionamiento de las neuronas. La existencia de conocimiento teórico sobre la enfermedad y la posibilidad del diseño de terapias posibles para ella constituyen un paso previo para investigar las causas y consecuencias funcionales de la misma.

Cita: Alcón Calderón, María Mercedes; Antolínez Fernández, Alvaro; García Fernández, Cristina (2020) Terapia génica contra la insensibilidad congénita al dolor con anhidrosis. Actas del V Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2020. 16-18 de marzo, 2020. Universidad de Alcalá. Alcalá de Henares, Madrid. España. dianas 9 (1): e202003fa04. ISSN 1886-8746 (electronic) journal.dianas.e202003fa04 http://www3.uah.es/dianas?e202003fa04. URI http://hdl.handle.net/10017/15181. DOI https://doi.org/10.37536/DIANAS.2020.9.1.56

Copyright: © Alcón-Calderón MM, Antolínez-Fernández A, García-Fernández C. Algunos derechos reservados. Este es un artículo open-access distribuido bajo los términos de una licencia de Creative Commons Reconocimiento-NoComercial-SinObraDerivada 4.0 Internacional. http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/

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dianas 9 (1) Guerrero-Amelín etal 2020 Estudio teórico para el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer con terapia combinada: desarrollo e innovación.

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dianas | Vol 9 Num 1 | marzo 2020 | e202003fa03

Estudio teórico para el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer con terapia combinada: desarrollo e innovación.

Departamento de Biología de Sistemas, Universidad de Alcalá. 28871, Alcalá de Henares, Madrid. España.

acarolina.guerreroa@edu.uah.es  bstm.97@hotmail.com  cjefrudi@hotmail.es  dvictorlombardo20@gmail.com  acarolina.guerreroa@edu.uah.es  bstm.97@hotmail.com  cjefrudi@hotmail.es  dvictorlombardo20@gmail.com

V Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2020
Departamento de Biología de Sistemas, Facultad de Medicina, Universidad de Alcalá (UAH). Alcalá de Henares, Madrid (Spain)

Resumen

Las enfermedades neurodegenerativas suponen un gran problema de manera global, no existiendo tratamientos efectivos para su tratamiento. Estas enfermedades generalmente se encuentran ligadas a la edad, siendo uno de los principales factores de riesgo de estas. Cada vez nos encontramos con una población más envejecida globalmente gracias a los avances en Medicina, y la prevalencia de estas patologías aumenta a un ritmo desorbitado. Una de las principales enfermedades dentro de este grupo es el Alzheimer. Esta patología supone un gran costo social (por la incapacidad que produce) y sanitario (por el cuidado y tratamiento de estos pacientes) y algunos autores la consideran la gran pandemia del siglo XXI (con 5-7 millones de nuevos casos al año y 44 millones de personas afectadas). El Alzheimer afecta al SNC, caracterizada por la pérdida de sinapsis y de memoria de forma progresiva. Sin embargo, el mayor problema actual es que no existen técnicas que nos ayuden al diagnóstico precoz ni se conoce su etiología. Pese a que se han planteado numerosas hipótesis para explicar su origen (destacando la hipótesis Tau, amiloide y colinérgica), ninguna de ellas ha podido explicar la etiopatogenia real de la enfermedad. Tras un estudio exhaustivo de las vías y rutas de señalización implicadas en el Alzheimer, nuestro grupo ha decidido, de manera totalmente novedosa, abordar el tratamiento de esta enfermedad desde dos puntos distintos, realizando un estudio teórico del resultado de la terapia combinada y presentando el diseño experimental a seguir para el desarrollo de un nuevo fármaco que ayude a estos pacientes. Nuestra estrategia es el diseño de péptidos análogos al reticulón 3 (RTN-3), el cual es una proteína poco estudiada cuya función es la unión a la β-secretasa (BACE-1, responsable de la formación de las placas amiloides que dañan el tejido neuronal y que se encuentra sobreexpresada en esta patología) e inhibirla. La otra protagonista de la terapia combinada es una molécula inhibidora de GSK-3β de forma ATP no competitiva (enzima causante de la fosforilación de Tau y su agregación, formando los ovillos neurofibrilares característicos del Alzheimer). En nuestro trabajo se muestra detalladamente el proceso de cribado (High Throughput Screening) a seguir, con todas las técnicas a emplear, para el desarrollo del péptido análogo al RTN-3, de manera totalmente científica, documentada y analizada tras revisar la literatura, aplicando técnicas de Biología celular, molecular y ensayos en animales, presentando los resultados esperados de manera teórica, y mostrando el proceso de selección de líneas celulares, modelos animales, técnicas, instrumentos y moléculas de forma veraz y totalmente análoga a la realidad.

Cita: Guerrero-Amelín, Carolina; Takvor, Samuel; Frutos, Jesús; Lombardo, Víctor (2020) Estudio teórico para el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer con terapia combinada: desarrollo e innovación. Actas del V Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2020. Departamento de Biología de Sistemas, Facultad de Medicina, Universidad de Alcalá (UAH). Alcalá de Henares, Madrid (Spain). dianas 9 (1): e202003fa03. ISSN 1886-8746 (electronic) journal.dianas.e202003fa03 http://www3.uah.es/dianas?e202003fa03. URI http://hdl.handle.net/10017/15181. DOI https://doi.org/10.37536/DIANAS.2020.9.1.55

Copyright: © Guerrero-Amelín C, Takvor S, Frutos J, Lombardo V. Algunos derechos reservados. Este es un artículo open-access distribuido bajo los términos de una licencia de Creative Commons Reconocimiento-NoComercial-SinObraDerivada 4.0 Internacional. http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/

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dianas 9 (1) San-Isidro etal 2020 Diseño teórico de terapia combinada con un inhibidor de BMPR y un miRNA contra RUNX-2 en la Enfermedad de la Válvula Aórtica Calcificada.

dianas 9(1) > San-Isidro etal

dianas | Vol 9 Num 1 | marzo 2020 | e202003fa02

Diseño teórico de terapia combinada con un inhibidor de BMPR y un miRNA contra RUNX-2 en la Enfermedad de la Válvula Aórtica Calcificada.

Unidad de Bioquímica y Biología Molecular, Departamento de Biología de Sistemas, Facultad de Medicina y Ciencias de la Salud, Universidad de Alcalá, 28871 Alcalá de Henares, Madrid, España.

aelisasanisidro@gmail.com  bdelatorrerubio.elena@gmail.com  cjudithrecio1997@gmail.com  dmcooky_8@hotmail.com

V Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2020
Departamento de Biología de Sistemas, Facultad de Medicina, Universidad de Alcalá (UAH). Alcalá de Henares, Madrid (Spain)

Resumen

La enfermedad de la válvula aórtica calcificada (EVAC) es una enfermedad caracterizada por la diferenciación de las células intersticiales de la válvula hacia un fenotipo pre-osteoblástico. Esta diferenciación celular produce una matriz calcificada, causando de esta forma un remodelaje tisular que conlleva a la estenosis aórtica y a una pérdida de la funcionalidad. Nuestro proyecto se enfoca en evitar la diferenciación osteoblástica inhibiendo la cascada de señalización de BMP2 y el factor de transcripción RUNX-2. Para ello planteamos el siguiente diseño teórico de la investigación que se realizaría para llevar a cabo el descubrimiento de 2 posibles fármacos empleados sinérgicamente en una terapia combinada.

Cita: San Isidro, Elisa; de la Torre-Rubio, Elena; Recio, Judith; Cook, Alberto (2020) Diseño teórico de terapia combinada con un inhibidor de BMPR y un miRNA contra RUNX-2 en la Enfermedad de la Válvula Aórtica Calcificada. Actas del V Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2020. Departamento de Biología de Sistemas, Facultad de Medicina, Universidad de Alcalá (UAH). Alcalá de Henares, Madrid (Spain). dianas 9 (1): e202003fa02. ISSN 1886-8746 (electronic) journal.dianas.e202003fa02 http://www3.uah.es/dianas?e202003fa02. URI http://hdl.handle.net/10017/15181. DOI https://doi.org/10.37536/DIANAS.2020.9.1.54

Copyright: © San-Isidro E, de-la-Torre-Rubio E, Recio J, Cook A. Algunos derechos reservados. Este es un artículo open-access distribuido bajo los términos de una licencia de Creative Commons Reconocimiento-NoComercial-SinObraDerivada 4.0 Internacional. http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/

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dianas 9 (1) Carrasco-Rubio etal 2020 Estudio teórico de SFRP1 como nueva diana terapéutica para el tratamiento del Alzheimer.

dianas 9(1) > Carrasco-Rubio etal

dianas | Vol 9 Num 1 | marzo 2020 | e202003fa01

Estudio teórico de SFRP1 como nueva diana terapéutica para el tratamiento del Alzheimer.

Departamento de Biología de Sistemas, Facultad de Medicina, Universidad de Alcalá (UAH). Alcalá de Henares (Madrid).

alauralcr20@hotmail.com; lcrlaura20@gmail.com  blaligonzalezc16@gmail.com  cjavier.mzdr@gmail.com  dmartinezpasabadosirene@gmail.com

V Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2020
Departamento de Biología de Sistemas, Facultad de Medicina, Universidad de Alcalá (UAH). Alcalá de Henares, Madrid (Spain)

Resumen

La enfermedad de Alzheimer (EA) es una enfermedad neurodegenerativa del sistema nervioso central caracterizada por una muerte progresiva neuronal que afecta principalmente a regiones corticales del cerebro y parte del sistema límbico. Se producen alteraciones en la memoria, el lenguaje, la percepción, la orientación y las funciones ejecutivas, siendo una de las principales causas de demencia en el mundo. Una de las principales características de la EA es la aparición de placas seniles o amiloides. Las placas seniles son depósitos extra-neuronales conformados por la acumulación del péptido Aβ-42 (péptido β-amiloide), producido por la proteólisis de la proteína precursora amiloide (APP) por β-secretasa y γ-secretasa. En cambio, la escisión no patológica de APP se produce por α-secretasa y γ-secretasa. Se prevé que la EA afecte a más de 150 millones de personas para 2050, convirtiéndose en un problema socioeconómico grave. Pese a todos los esfuerzos, aún no se ha conseguido ninguna terapia efectiva. Debido a la ineficacia en las terapias contra las dianas terapéuticas conocidas actualmente, en el presente trabajo hemos investigado la proteína SFRP1 como una nueva diana terapéutica potencial. SFRP1 se encuentra sobre-expresada en pacientes con EA produciendo inhibición de ADAM10 (α-secretasa), favoreciendo la formación del péptido β-amiloide. Hemos desarrollado, de forma teórica, un proyecto para conseguir compuestos que inhiban SFRP1 e impidan su unión a ADAM10, de forma que esta α-secretasa pueda realizar su función. Para este proyecto teórico asumimos que disponemos de una librería con numerosos compuestos químicos a partir de la cual diseñamos un proceso de drug discovery con el objetivo de conseguir un compuesto con capacidad de inhibir a SFRP1 cuyas propiedades permitan su uso como fármaco. Para ello hemos desarrollado un pre-cribado computacional y un posterior ensayo de alto rendimiento (HTS) mediante FRET. Este ensayo nos permitiría identificar qué compuestos cuentan con un mayor porcentaje de inhibición y serían re-evaluados con ensayos HTS para seleccionar aquellos con menor IC-50 y mayor selectividad frente a SFRP1. A continuación, se evaluarán mediante un ensayo PAMPA los compuestos con capacidad para atravesar la barrera hematoencefálica y se realizarán estudios in vivo en células telencefálicas e in vitro en modelos de murinos de EA para confirmar su eficacia. Por último, se desarrollarían estudios pre-clínicos de farmacología y toxicología de los compuestos seleccionados, como paso previo al estudio del fármaco en ensayos clínicos para comprobar si finalmente podría usarse como tratamiento de la EA.

Cita: Carrasco-Rubio, Laura; González-Carrión, Eulalia; Martínez-del-Río, Javier; Martínez-Pasabados, Irene (2020) Estudio teórico de SFRP1 como nueva diana terapéutica para el tratamiento del Alzheimer. Actas del V Congreso de Señalización Celular, SECUAH 2020. Departamento de Biología de Sistemas, Facultad de Medicina, Universidad de Alcalá (UAH). Alcalá de Henares, Madrid (Spain). dianas 9 (1): e202003fa01. ISSN 1886-8746 (electronic) journal.dianas.e202003fa01 http://www3.uah.es/dianas?e202003fa01. URI http://hdl.handle.net/10017/15181. DOI https://doi.org/10.37536/DIANAS.2020.9.1.53

Copyright: © Carrasco-Rubio L, González-Carrión E, Martínez-del-Río J, Martínez-Pasabados I. Algunos derechos reservados. Este es un artículo open-access distribuido bajo los términos de una licencia de Creative Commons Reconocimiento-NoComercial-SinObraDerivada 4.0 Internacional. http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/

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dianas 8 (2) Ayuso-García etal 2019 Papel de CEBPD en el desarrollo de resistencias del cáncer de próstata al tratamiento hormonal y su posible regulación por AR-V7.

dianas 8(2) > Ayuso-García etal

dianas | Vol 8 Num 2 | septiembre 2019 | e201909fa09

Papel de CEBPD en el desarrollo de resistencias del cáncer de próstata al tratamiento hormonal y su posible regulación por AR-V7

Unidad de Bioquímica y Biología Molecular, Departamento de Biología de Sistemas, Facultad de Medicina y Ciencias de la salud, Universidad de Alcalá, 28871 Alcalá de Henares, Madrid, España.

Resumen

El cáncer de próstata (CP) es la segunda causa de muerte por cáncer en hombres en el mundo occidental. Inicialmente, el desarrollo del CP es dependiente de andrógenos, por lo que, el tratamiento convencional consiste en la ablación androgénica. Aunque se consigue la regresión del tumor, en un alto porcentaje de pacientes progresa hacia formas más agresivas de la enfermedad denominadas cáncer de próstata resistente a la castración (CRPC). Entre los mecanismos por los cuales se desarrolla la resistencia se ha descrito el incremento de la variante de splicing AR-V7 del receptor de andrógenos (AR). Basándonos en estudios previos en los que se definió el perfil de metilación en CRPC, se seleccionó CEBPD por estar silenciado por metilación de su promotor en una línea celular de CRPC (LNCaP abl), mientras que sí se expresa en células de cáncer de próstata sensibles a andrógenos (LNCaP). En este trabajo nos planteamos un doble objetivo: determinar el posible papel de AR-V7 en la regulación de CEBPD en las células LNCaP abl e intentar esclarecer el papel de este gen en el desarrollo de la resistencia de los tumores de próstata a la ablación androgénica. Nuestros resultados indican que AR interacciona con el promotor de CEBPD en células LNCaP, mientras que en células LNCaP abl se unen tanto AR como AR-V7. Por otro lado, se observó que el silenciamiento de CEBPD en células LNCaP induce apoptosis y, sorprendentemente, también aumenta la migración e invasión. A la vista de estos resultados podemos concluir: en primer lugar, que AR-V7 podría estar reprimiendo la expresión de CEBPD en células CRPC mediante el reclutamiento de complejos represores; en segundo lugar, que CEBPD podría desempeñar un papel dual impidiendo la apoptosis, así como la migración e invasión en células de cáncer de próstata sensibles a andrógenos.

Cita: Ayuso García, Paula; Ropero Salinas, Santiago; Colás Escudero, Begoña (2019) Papel de CEBPD en el desarrollo de resistencias del cáncer de próstata al tratamiento hormonal y su posible regulación por AR-V7. dianas 8 (2): e201909fa09. ISSN 1886-8746 (electronic) journal.dianas.e201909fa09 http://www3.uah.es/dianas?e201909fa09. URI http://hdl.handle.net/10017/15181. DOI https://doi.org/10.37536/DIANAS.2019.8.2.52

Copyright: © Ayuso-García P, Ropero-Salinas S, Colás-Escudero B. Algunos derechos reservados. Este es un artículo open-access distribuido bajo los términos de una licencia de Creative Commons Reconocimiento-NoComercial-SinObraDerivada 4.0 Internacional. http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/

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dianas 8 (2) Baños-Sánchez etal 2019 Estudio del potencial de bioconjugados Quantum Dots para el marcaje específico de dianas involucradas en Esclerosis Lateral Amiotrófica.

dianas 8(2) > Baños-Sánchez etal

dianas | Vol 8 Num 2 | septiembre 2019 | e201909fa08

Estudio del potencial de bioconjugados Quantum Dots para el marcaje específico de dianas involucradas en Esclerosis Lateral Amiotrófica.

1. Unidad de Bioquímica y Biología Molecular, Departamento de Biología de Sistemas, Facultad de Medicina y Ciencias de la Salud, Universidad de Alcalá, 28871 Alcalá de Henares, Madrid, España.  2. Grupo de Biosensores y Química Biológica, Centro de Investigaciones Biológicas- CSIC, Madrid, España.

anere11a@hotmail.com

Resumen

La investigación biomédica se encuentra en continuo avance y requiere la implantación de técnicas novedosas y prometedoras que permitan esclarecer mecanismos de enfermedades y seleccionar medicamentos eficaces para las mismas. El fin de estas técnicas es poder aplicar un tratamiento individualizado a cada paciente, es decir, implantar la medicina personalizada y para ello son necesarios biomarcadores y sensores efectivos. La técnica Multicolor Multicycle Molecular profiling (M3P), la cual se quiere aplicar en patologías de gran complejidad molecular como la esclerosis lateral amiotrofia (ELA), entre otras, utiliza Quantum Dots (QDs), nanopartículas con características fotoluminiscentes únicas y ventajosas sobre los fluoróforos tradicionales y con gran potencial como herramienta puntera en el campo de la biomedicina. En este trabajo se muestran los resultados obtenidos tras la realización de distintos inmunoensayos de QDs para estudiar su efectividad de marcaje de proteínas, la penetrabilidad en el núcleo y en consecuencia su potencial para seleccionar fármacos eficaces para patologías complejas como la ELA.

Cita: Baños Sánchez, Nerea; Tosat- Bitrián, Carlota; Palomo, Valle (2019) Estudio del potencial de bioconjugados Quantum Dots para el marcaje específico de dianas involucradas en Esclerosis Lateral Amiotrófica. dianas 8 (2): e201909fa08. ISSN 1886-8746 (electronic) journal.dianas.e201909fa08 http://www3.uah.es/dianas?e201909fa08. URI http://hdl.handle.net/10017/15181. DOI https://doi.org/10.37536/DIANAS.2019.8.2.51

Copyright: © Baños-Sánchez N, Tosat--Bitrián C, Palomo V. Algunos derechos reservados. Este es un artículo open-access distribuido bajo los términos de una licencia de Creative Commons Reconocimiento-NoComercial-SinObraDerivada 4.0 Internacional. http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/

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dianas 8 (2) Moreno-de-la-Cruz y García-Gonzalo 2019 Estudio de la interaccióndel receptor Htr6 de serotonina con las proteínas Cdk5 y TULP3.

dianas 8(2) > Moreno-de-la-Cruz y García-Gonzalo

dianas | Vol 8 Num 2 | septiembre 2019 | e201909fa07

Estudio de la interaccióndel receptor Htr6 de serotonina con las proteínas Cdk5 y TULP3.

1. Unidad de Bioquímica y Biología Molecular, Departamento de Biología de Sistemas, Facultad de Medicina y Ciencias de la salud, Universidad de Alcalá, 28871 Alcalá de Henares, Madrid, España.  2. Departamento de Modelos Experimentales de Enfermedades Humanas, Instituto de Investigaciones Biomédicas Alberto Sols, 28029 Madrid, España.

apmoreno.bm@gmail.com  bfrancesc.garcia@uam.es

Resumen

Los cilios primarios son prolongaciones de la membrana plasmática en cuya membrana hay una gran cantidad de canales iónicos y receptores como los GPCRs. En concreto, nuestro estudio lo centramos en el receptor ciliar Htr6 de serotonina, el cual es un GPCR de la familia de las rodopsinas, de gran importancia a nivel neuronal. Aunque sus mecanismos de señalización son poco conocidos todavía, se ha visto que este receptor interacciona mediante su extremo C-terminal con una gran cantidad de proteínas implicadas en diferentes vías de señalización. Mediante ensayos de coinmunoprecipitación en células HEK293T, hemos estudiado la interacción del receptor Htr6 con una proteína efectora denominada Cdk5, la cual fosforila dicho receptor. Sin embargo, no obtuvimos resultados que confirmen dicha unión. Por otro lado, el tráfico ciliar de las proteínas de membrana al cilio, incluido el receptor Htr6, es poco conocido por lo que en este estudio esclarecemos el mecanismo de transporte. Para ello, realizamos ensayos de interacción por biotinilación en células HEK293T para analizar la interacción del receptor Htr6 con la proteína TULP3, la cual actúa como proteína adaptadora para el tráfico ciliar de proteínas de membrana. En concreto, estudiamos la interacción de la proteína TULP3 completa, y de sus dominios N-terminal y C-terminal con la CLS del dominio C-terminal del receptor Htr6. De acuerdo con el modelo actual que explica el tráfico ciliar de proteínas de membrana, observamos la interacción entre el extremo C-terminal del receptor Htr6 con el dominio C-terminal de la proteína TULP3. Esto nos permitirá conocer el mecanismo de entrada de ciertas proteínas en el cilio.

Cita: Moreno de la Cruz, Paula; García Gonzalo, Francesc (2019) Estudio de la interaccióndel receptor Htr6 de serotonina con las proteínas Cdk5 y TULP3. dianas 8 (2): e201909fa07. ISSN 1886-8746 (electronic) journal.dianas.e201909fa07 http://www3.uah.es/dianas?e201909fa07. URI http://hdl.handle.net/10017/15181. DOI https://doi.org/10.37536/DIANAS.2019.8.2.50

Copyright: © Moreno-de-la-Cruz P, García-Gonzalo F. Algunos derechos reservados. Este es un artículo open-access distribuido bajo los términos de una licencia de Creative Commons Reconocimiento-NoComercial-SinObraDerivada 4.0 Internacional. http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/

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dianas 8 (2) Serrano-García etal 2019 Análisis molecular de las relaciones entre hiperlipidemia y fibrosis vascular.

dianas 8(2) > Serrano-García etal

dianas | Vol 8 Num 2 | septiembre 2019 | e201909fa06

Análisis molecular de las relaciones entre hiperlipidemia y fibrosis vascular.

1. Unidad de Bioquímica y Biología Molecular, Departamento de Biología de Sistemas, Facultad de Medicina y Ciencias de la Salud, Universidad de Alcalá, 28871 Alcalá de Henares, Madrid, España.  2. Fundación para la Investigación Biomédica del Hospital Universitario Príncipe de Asturias, Alcalá de Henares, Madrid, España.  3. Dpto. Biología de Sistemas, Universidad de Alcalá, Alcalá de Henares, Madrid, España.  4. Instituto Reina Sofía de Investigación Nefrológica (IRSIN) y Red Renal (REDinREN) del ISCIII, Madrid, España.

Resumen

La hiperlipidemia es uno de los desórdenes metabólicos más implicados en enfermedades cardiovasculares como la aterosclerosis que cursa con un aumento de LDL oxidadas (OxLDL) en sangre. El objetivo del estudio fue establecer la relación entre hiperlipidemia y fibrosis vascular, evaluando los mecanismos implicados. Para ello, se incubaron células endoteliales con OxLDL encontrando un aumento tanto en la expresión de fibronectina como en la producción de radicales libres. Las OxLDL revelaron la activación del factor de transcripción NFkB vía producción de radicales libres. Además, experimentos con EMSA confirman que el factor NFkB está implicado directamente en el aumento de la expresión de fibronectina estimulado por las OxLDL en células endoteliales. Por otro lado, las OxLDL son capaces de inducir la expresión del enzima conversor de endotelina-1 y la producción de endotelina-1 (ET-1). La ET-1 sintetizada en células endoteliales se libera y llega a otros tipos celulares. Por tanto, se analizó el efecto directo de la ET-1 en células musculares lisas (CML). La ET-1 también estimula fibrosis en CML medida como expresión de la proteína pro-fibrótica CTGF y las proteínas de MEC, fibronectina y colágeno I. La ET-1 también favorece la producción de radicales libres. El efecto de la ET-1 sobre la fibrosis fue específico de su unión al receptor ETA presente en CML, porque el antagonista específico BQ123 bloqueó completamente el efecto de la ET-1. En conclusión, durante la aterosclerosis se favorecerían los procesos de fibrosis tanto a nivel endotelial por las OxLDL como a nivel muscular por la ET-1 generada por ellas, que podría ser la causa de la disfunción vascular presente en la aterosclerosis.

Cita: Serrano-García, Lucía; Asenjo-Bueno, Ana; Henández-López, Kevin; Alcalde-Estévez, Elena; Plaza, Patricia; Sosa, Patricia; Olmos, Gemma; Ruíz-Torres, María Piedad; López Ongil, Susana (2019) Análisis molecular de las relaciones entre hiperlipidemia y fibrosis vascular. dianas 8 (2): e201909fa06. ISSN 1886-8746 (electronic) journal.dianas.e201909fa06 http://www3.uah.es/dianas?e201909fa06. URI http://hdl.handle.net/10017/15181. DOI https://doi.org/10.37536/DIANAS.2019.8.2.49

Copyright: © Serrano-García L, Asenjo-Bueno A, Henández-López K, Alcalde-Estévez E, Plaza P, Sosa P, Olmos G, Ruíz-Torres MP, López-Ongil S. Algunos derechos reservados. Este es un artículo open-access distribuido bajo los términos de una licencia de Creative Commons Reconocimiento-NoComercial-SinObraDerivada 4.0 Internacional. http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/

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dianas 8 (2) Mínguez-Martínez etal 2019 Diseño y predicción de promotores específicos de neuroblastoma.

dianas 8(2) > Mínguez-Martínez etal

dianas | Vol 8 Num 2 | septiembre 2019 | e201909fa05

Diseño y predicción de promotores específicos de neuroblastoma.

1. Unidad de Bioquímica y Biología Molecular, Departamento de Biología de Sistemas, Facultad de Medicina y Ciencias de la Salud, Universidad de Alcalá, 28871 Alcalá de Henares, Madrid, España.  2. Centro Nacional de Investigaciones Oncológicas (CNIO), Madrid, España.

ajorge_minguez@hotmail.com  bsrodriguezp@cnio.es

Resumen

El neuroblastoma es una enfermedad infantil caracterizada por el desarrollo de tumores a partir de células cancerígenas del tejido nervioso de las glándulas suprarrenales. Existen marcadores genéticos para caracterizar, clasificar y diagnosticar este tipo de tumores. Un ejemplo de estos marcadores es la amplificación de MYCN, frecuentemente utilizada como herramienta de pronóstico. A pesar de los tratamientos disponibles actualmente, el neuroblastoma es un tipo de cáncer que sigue estando caracterizado por una alta mortalidad. Por este motivo, es necesario el desarrollo de nuevas terapias que dirijan su acción específicamente a este tipo de células tumorales, maximizando su actividad en el tejido diana y reduciendo su toxicidad en otros tejidos. Un ejemplo de este tipo de terapia podría ser la edición génica. Para lograr una expresión específica en un tejido determinado, la expresión de genes terapéuticos debe estar controlada por promotores específicos de ese tejido. Para ello se deben analizar las secuencias promotoras que regulan la transcripción de genes cuya expresión sea restringida a neuroblastoma. Sin embargo, estas secuencias promotoras abarcan grandes regiones de ADN, y los vectores utilizados en terapia génica solamente pueden incorporar secuencias de un tamaño limitado. Por esta razón, se deben seleccionar los fragmentos esenciales que garantizan el funcionamiento del promotor. En este trabajo, se realiza un análisis y predicción de las secuencias fundamentales de cuatro promotores de proteínas expresadas diferencialmente en neuroblastoma para, posteriormente, evaluar su actividad mediante la medida de la expresión de una proteína reportera.

Cita: Mínguez Martínez, Jorge; Torres Ruíz, Raúl; Rodríguez Perales, Sandra (2019) Diseño y predicción de promotores específicos de neuroblastoma. dianas 8 (2): e201909fa05. ISSN 1886-8746 (electronic) journal.dianas.e201909fa05 http://www3.uah.es/dianas?e201909fa05. URI http://hdl.handle.net/10017/15181. DOI https://doi.org/10.37536/DIANAS.2019.8.2.48

Copyright: © Mínguez-Martínez J, Torres-Ruíz R, Rodríguez-Perales S. Algunos derechos reservados. Este es un artículo open-access distribuido bajo los términos de una licencia de Creative Commons Reconocimiento-NoComercial-SinObraDerivada 4.0 Internacional. http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/

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